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L-WRN小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞

型　號(hào)

產(chǎn)品時(shí)間2024-12-05

所屬分類(lèi)小鼠細(xì)胞系

報(bào)價(jià)1500

產(chǎn)品描述：L-WRN小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：微粒體甘肽S轉(zhuǎn)移酶（GSH ST）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
胞漿甘肽S轉(zhuǎn)移酶（GSH ST）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
細(xì)胞甘肽還原酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
血液甘肽還原酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
組織甘肽還原酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒

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產(chǎn)品概述

傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度，當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)到80%~90%時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶?jī)?nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀(guān)察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí)，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過(guò)度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

L-WRN小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性：

產(chǎn)品名稱(chēng)	L-WRN小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞	性別	雄性
種屬	小鼠	年齡	100天
生長(zhǎng)特性	貼壁生長(zhǎng)	組織來(lái)源	皮下結(jié)締組織
細(xì)胞代數(shù)	10代以?xún)?nèi)	凍存條件	無(wú)血清凍存液，液氮儲(chǔ)存

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

細(xì)胞別稱(chēng)　L-WRN；小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài);成纖維細(xì)胞樣

細(xì)胞代數(shù);10代以?xún)?nèi)

背景介紹;L-WRN細(xì)胞通過(guò)R-spondin 3和noggin共表達(dá)載體轉(zhuǎn)染L-Wnt3A 獲得，并在含有G418和濕霉素b的培養(yǎng)基中選擇穩(wěn)定克隆。

生物安全等級(jí);2

細(xì)胞類(lèi)型;

自發(fā)永生化細(xì)胞;

細(xì)胞規(guī)格;1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝

支原體檢測(cè);無(wú)

傳代比例;1:2至1:3，每周2- 3次

培養(yǎng)基;DMEM+10% FBS+0.5 mg/ml G418+0.5 mg/ml hygromycinB+PS

培養(yǎng)條件;氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃

凍存條件無(wú)血清凍存液，液氮儲(chǔ)

發(fā)貨方式復(fù)蘇發(fā)貨（免運(yùn)輸費(fèi)用）/ 凍存發(fā)貨（需加干冰運(yùn)輸費(fèi)用）順豐快遞

供應(yīng)限制僅限于科學(xué)研究，絕不可作為動(dòng)物或人類(lèi)疾病的治療產(chǎn)品使用

特別說(shuō)明以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)為主

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀(guān)察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長(zhǎng)滿(mǎn)至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無(wú)菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無(wú)菌，且須在無(wú)菌超凈工作臺(tái)中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長(zhǎng)。來(lái)源于不同動(dòng)物種類(lèi)、組織類(lèi)型的細(xì)胞，對(duì)培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對(duì)于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)起著關(guān)鍵作用。可根據(jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過(guò)短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過(guò)小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過(guò)大對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴螅瑧?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過(guò)程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。