型 號(hào)
產(chǎn)品時(shí)間2024-12-05
所屬分類小鼠細(xì)胞系
報(bào)價(jià)1500
ES-E14TG2a小鼠胚胎干細(xì)胞
細(xì)胞基本屬性：
產(chǎn)品名稱 | ES-E14TG2a小鼠胚胎干細(xì)胞 | 組織來(lái)源 | 胚胎 |
種屬 | 小鼠 | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁生長(zhǎng) |
細(xì)胞代數(shù) | 10代以內(nèi) | 細(xì)胞形態(tài) | 球形克隆細(xì)胞樣 |
| 支原體檢測(cè) | 無(wú) | 凍存條件 | 無(wú)血清凍存液，液氮儲(chǔ)存 |
細(xì)胞詳細(xì)介紹：
細(xì)胞別稱 ES-E14TG2a；小鼠胚胎干細(xì)胞 背景介紹;ES-E14TG2a細(xì)胞缺乏HGPRT（HPRT），并且對(duì)0.06 mM的6-硫有抗性。當(dāng)在飼養(yǎng)層（胚胎成纖維細(xì)胞或STO細(xì)胞）上培養(yǎng)時(shí)，細(xì)胞保持未分化狀態(tài)。在沒(méi)有飼養(yǎng)層的情況下，細(xì)胞自發(fā)分化并形成胚胎結(jié)構(gòu)。當(dāng)注入胚泡中時(shí)，細(xì)胞可以進(jìn)入生殖系。在常規(guī)的分子基因修飾技術(shù)之后，它們可用于重構(gòu)小鼠胚胎。 細(xì)胞規(guī)格;1x106cells/T25或1mL凍存管 支原體檢測(cè);無(wú) 培養(yǎng)基;DMEM+15%FBS+1%L-Glu+1%NEAA+1%丙酮酸鈉+1uL/mLβ-Me+0.1uL/mLLIF+1%雙抗 培養(yǎng)條件;氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃ 凍存條件無(wú)血清凍存液，液氮儲(chǔ) 發(fā)貨方式復(fù)蘇發(fā)貨（免運(yùn)輸費(fèi)用）/ 凍存發(fā)貨（需加干冰運(yùn)輸費(fèi)用） 順豐快遞 供應(yīng)限制僅限于科學(xué)研究，絕不可作為動(dòng)物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用 特別說(shuō)明以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說(shuō)明書為主 |
二、懸浮細(xì)胞
傳代培養(yǎng)操作步驟如下：
一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長(zhǎng)滿至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時(shí)，即可進(jìn)行傳代。
（1）嚴(yán)格進(jìn)行無(wú)菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無(wú)菌，且須在無(wú)菌超凈工作臺(tái)中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。
（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長(zhǎng)。來(lái)源于不同動(dòng)物種類、組織類型的細(xì)胞，對(duì)培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。
（3）胎牛血清對(duì)于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)起著關(guān)鍵作用。可根據(jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。
（4）消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過(guò)短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。
（5）細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過(guò)小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過(guò)大對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴螅瑧?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。
（6）吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過(guò)程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。
公司正在出售的產(chǎn)品：
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腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白3抗體
骨髓基質(zhì)干細(xì)胞抗原2抗體
溶質(zhì)載體家族蛋白38成員1抗體
MON1A蛋白抗體
酰基合成酶4抗體
抗體
磷酸化HOMER3蛋白抗體
CD4抗體
ES-E14TG2a小鼠胚胎干細(xì)胞血清應(yīng)答因子結(jié)合蛋白1抗體
傳代培養(yǎng)操作步驟：
一、貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：
（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度，當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)到80%~90%時(shí)，即可進(jìn)行傳代。
（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。
（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶?jī)?nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。
（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí)，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過(guò)度。
（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。
（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。
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