原代細胞的分離培養：
原代培養即直接從有機體取下細胞、組織或器官，讓它們在體外維持與生長。原代培養的特點是細胞或組織剛離開機體，它們的生物性狀尚未發生很大的改變，在一定程度上可反映它們在體內的狀態，表現出來源組織或細胞的特性， 因此用于藥物實驗，尤其是藥物對細胞活動、結構、代謝、有無毒性或殺傷作用等，是的工具。常用的原代培養法有組織塊培養法和消化培養法。
（一）組織塊培養法
許多實驗室喜歡用組織塊培養法進行原代培養，因為方法簡單，細胞也較容易生長。尤其是培養心肌，有時還可觀察到心肌組織塊搏動。細胞從組織塊邊緣向外長出并鋪滿培養皿或培養瓶后， 即可進行傳代。
1. 設備材料
培養箱、冰箱、超凈工作臺／無菌間、無菌吸管、離心管、酒精燈、試管架、培養瓶、培養皿、消化液、基礎培養液、胎牛血清、Hanks 溶液、雙抗試液、剪刀、攝子、小燒杯。
2. 操作步驟
（1） 在無菌條件下，取待培養的組織適量，置入小燒杯中， 以適量Hanks 溶液清洗2~3 次，去掉組織塊表面的血污。
（2）用眼科剪將組織塊反復剪成0.5~ 1mm3的小塊。
（3）再用Hanks 溶液反復漂洗， 直至液體不混濁為止。等組織塊下沉，將燒杯傾斜，用小吸管盡量吸除Hanks 溶液。
（4）用含20%滅活血清及雙抗溶液(200U/ml、200μg/ml）的培養液再清洗，用吸管吸干后加入5ml 含20％血清的培養液。
（5）用彎頭吸管吸取組織小塊，均勻地置于培養皿內表面，吸去多余的培養液，各組織小塊之間相距0.5cm 為宜。蓋好培養皿蓋，做好標記， 置37°C 的CO2培養箱內。
（6） 2~4h 后，于超凈工作臺中，緩緩地向培養皿中加入上述含20％血清及雙抗溶液( 100U/ml 及100μg/ml ）的培養液少量，以使組織塊浸沒在培養液中。
（7）輕輕地將培養皿及組織塊移至CO2 培養箱， 如無特殊情況，不必觀察。1~2 周后，可觀察到細胞從組織塊邊緣長出，形成生長暈。
（9） 一般說來，若培養液無明顯改變， 1 周換液1 次即可。待細胞長滿整個培養皿內表面，即可進行傳代培養。
豬主動脈內皮細胞
細胞基本屬性：
產品名稱 | 豬主動脈內皮細胞 | 組織來源 | 主動脈 |
種屬 | 豬 | 生長特性 | 貼壁生長 |
形態特征 | 內皮細胞樣 | 英文名稱 | Porcine Aortic Endothelial Cells |
貨號 | EY-XY4218 | 規格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 |
質量檢測：血小板-內皮細胞粘附分子（PECAM-1/CD31）或血管假性血友病因子（vWF）免疫熒光染色為陽性，純度高于 90%，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等
產品規格：5x105cells/T25或1mL凍存管
培養基：豬主動脈內皮細胞培養基
培養條件：氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃
換液頻率：每2-3天換液一次
消化液：0.25%
產品貨期現貨，1周左右
運輸方式T25培養瓶/ 順豐快遞（包郵）
供應限制僅限于科學研究，絕不可作為動物或人類疾病的治療產品使用
背景介紹：
主動脈內皮細胞（aortic endothelial cells）組成了主動脈內壁，并持續受到血流剪切應力的影響。內皮細胞在切應力的作用下，分泌不同的內皮因子并進而影響血管收縮和生長。主動脈內皮細胞也調節細胞黏附分子的表達來控制和精確調節炎癥反應和組織纖維化。體外培養的原代主動脈內皮細胞可有效地幫助研究者研究內皮功能失調的機理，動脈粥樣化等疾病的發病機理以及發展新的治療方法。 |
公司正在出售的產品：
小鼠E選擇素(SELE)ELISA試劑盒 ，英文名： SELE ELISA Kit
人肌酸激酶(CK)ELISA檢測試劑盒HumanCreatineKinase,CKELISAKit 96T/48T
大鼠合成酶(GLUL)免疫試劑盒 Rat Glamine syhetase,GLUL ELISA kit
CLIAKitforVIP(MouseVasoactiveIestinalPeptide)ELISAKit小鼠血管活性腸肽規格：48T/96T
毛發砷元素比色法定量檢測試劑盒20次
ELISAKiVAg人輪狀病毒抗原規格：48T/96T
小鼠纖連蛋白(FN)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat osteoprotegerin ligand (OPGL) ELISA Kit 大鼠骨保護素配體(OPGL)ELISA試劑盒
Humandopaminedecarboxylase,DDCELISAKit 人多巴胺脫羧酶(DDC)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
ChickenHeatShockProtein60,HSP-60ELISA試劑盒雞熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA試劑盒規格：96T/48T
載玻片細胞CDK2蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次
MouseHeatShockProteinglycoprotein96,HSPgp96ELISAKit小鼠熱休克蛋白糖蛋白96(HSPgp96)ELISA試劑盒規格：96T/48T
豬主動脈內皮細胞小鼠血管緊張素Ⅱ 英文名稱： Angiotensin Ⅱ 規格： 48T/96T 英文縮寫： ANGⅡ
小鼠血管生成素-2 英文名稱： Angiopoietin-2 規格： 48T/96T 英文縮寫： ANG 2
小鼠心素 英文名稱： aialnaiureticpeptide 規格： 48T/96T 英文縮寫： ANP
小鼠凋亡誘導因子 英文名稱： apoptosis-inducing factor 規格： 48T/96T 英文縮寫： AIF
操作方法：
組織塊直接培養法（原代細胞培養實驗）
材料與儀器
【動物】選擇大約一半足孕時間的胚胎，10－13天齡胚胎含有最大數量的未分化的間質細胞，成纖維細胞可從這些細胞衍生獲得。每組小鼠胚胎1個【實驗材料】每組的超凈臺中有以下物品：1.50ml配制好的RPMI1640培養液1瓶；8ml小牛血清（FCS)1瓶；100ml 0.25%瓶；PBS(-)1瓶2.100ml滅菌燒杯2個；3、50ml離心筒2個4、滅菌培養皿1個，細胞培養瓶1個5、1ml，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個6、細胞計數板1塊；7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把；8、酒精燈1臺；
步驟
1) 胚胎的分離。適用哺乳動物(倉鼠、小鼠和大鼠)2)將1－2個胚胎轉移至一個小的無菌培養皿中，用新的無菌剪刀小心地絞碎胚胎，用PBS漂洗。3)在無菌狀態下，將絞碎的胚胎轉移于一50ml的無菌離心筒中,加入40ml 0.25％的無菌,用攪拌棒輕輕攪動。4)在溫暖的環境中或置于37°C培養箱中輕輕搖動15分鐘。5)讓存留的組織塊在重力作用下慢慢沉降，將含有懸浮細胞的液體轉移至一無菌50ml的離心管中，該管內按照每10ml上清加入l ml小牛血清的比例加入牛血清以滅活,。6)加人新鮮溶液(見前述步驟)于含有殘留未消化組織塊的原來的50ml離心筒中，重復步驟4和5。7)離心混合的細胞懸液，1200r/rain，5分鐘，棄上清。8)用新鮮的無菌PBS重懸沉淀的細胞，按步驟7再次離心。9)用PBS反復洗滌細胞直至上清清亮為止。
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