型 號
產(chǎn)品時間2024-12-08
所屬分類其它類原代細胞
報價2600
原代細胞的分離培養(yǎng)：
原代培養(yǎng)即直接從有機體取下細胞、組織或器官，讓它們在體外維持與生長。原代培養(yǎng)的特點是細胞或組織剛離開機體，它們的生物性狀尚未發(fā)生很大的改變，在一定程度上可反映它們在體內(nèi)的狀態(tài)，表現(xiàn)出來源組織或細胞的特性， 因此用于藥物實驗，尤其是藥物對細胞活動、結(jié)構(gòu)、代謝、有無毒性或殺傷作用等，是的工具。常用的原代培養(yǎng)法有組織塊培養(yǎng)法和消化培養(yǎng)法。
（一）組織塊培養(yǎng)法
許多實驗室喜歡用組織塊培養(yǎng)法進行原代培養(yǎng)，因為方法簡單，細胞也較容易生長。尤其是培養(yǎng)心肌，有時還可觀察到心肌組織塊搏動。細胞從組織塊邊緣向外長出并鋪滿培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶后， 即可進行傳代。
1. 設(shè)備材料
培養(yǎng)箱、冰箱、超凈工作臺／無菌間、無菌吸管、離心管、酒精燈、試管架、培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿、消化液、基礎(chǔ)培養(yǎng)液、胎牛血清、Hanks 溶液、雙抗試液、剪刀、攝子、小燒杯。
2. 操作步驟
（1） 在無菌條件下，取待培養(yǎng)的組織適量，置入小燒杯中， 以適量Hanks 溶液清洗2~3 次，去掉組織塊表面的血污。
（2）用眼科剪將組織塊反復(fù)剪成0.5~ 1mm3的小塊。
（3）再用Hanks 溶液反復(fù)漂洗， 直至液體不混濁為止。等組織塊下沉，將燒杯傾斜，用小吸管盡量吸除Hanks 溶液。
（4）用含20%滅活血清及雙抗溶液(200U/ml、200μg/ml）的培養(yǎng)液再清洗，用吸管吸干后加入5ml 含20％血清的培養(yǎng)液。
（5）用彎頭吸管吸取組織小塊，均勻地置于培養(yǎng)皿內(nèi)表面，吸去多余的培養(yǎng)液，各組織小塊之間相距0.5cm 為宜。蓋好培養(yǎng)皿蓋，做好標記， 置37°C 的CO2培養(yǎng)箱內(nèi)。
（6） 2~4h 后，于超凈工作臺中，緩緩地向培養(yǎng)皿中加入上述含20％血清及雙抗溶液( 100U/ml 及100μg/ml ）的培養(yǎng)液少量，以使組織塊浸沒在培養(yǎng)液中。
（7）輕輕地將培養(yǎng)皿及組織塊移至CO2 培養(yǎng)箱， 如無特殊情況，不必觀察。1~2 周后，可觀察到細胞從組織塊邊緣長出，形成生長暈。
（9） 一般說來，若培養(yǎng)液無明顯改變， 1 周換液1 次即可。待細胞長滿整個培養(yǎng)皿內(nèi)表面，即可進行傳代培養(yǎng)。
牛骨髓單核細胞
細胞基本屬性：
產(chǎn)品名稱 | 牛骨髓單核細胞 | 組織來源 | 骨髓 |
種屬 | 牛 | 生長特性 | 半懸浮生長 |
分離方法 | 通過密度梯度離心法獲得 | 英文名稱 | bovine bone marrow Mononuclear Cells |
貨號 | EY-XY4179 | 規(guī)格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 |
細胞鑒定：MO-1或MO-2免疫熒光染色為陽性，細胞純度高于90%
支原體檢測：牛骨髓單核細胞不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌
產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25或1mL凍存管
培養(yǎng)基：牛骨髓單核細胞專用培養(yǎng)基
培養(yǎng)條件：氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃
凍存條件：無血清凍存液，液氮儲存
細胞代數(shù)：第1代
產(chǎn)品貨期現(xiàn)貨，1周左右
運輸方式T25培養(yǎng)瓶/ 順豐快遞（包郵）
供應(yīng)限制僅限于科學(xué)研究，絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用
背景介紹：
單核細胞是血液中大的血細胞，是機體防御系統(tǒng)的一個重要組成部分。與其他血細胞比較，單核細胞內(nèi)含有更多的非特異性脂酶，并且具有更強的吞噬作用。它通過吞噬和產(chǎn)生抗體等方式來抵御和消滅入侵的病原微生物。 單核細胞能吞噬異物產(chǎn)生抗體，在機體損傷治愈、抗御病原的入侵和對疾病的免疫方面起著重要的作用。機體發(fā)生炎癥或其他疾病都可引起單核細胞總數(shù)百分比發(fā)生變化，因此檢查單核細胞計數(shù)成為輔助診斷的一種重要方法。在機體的防護、免疫和創(chuàng)傷愈治過程中起協(xié)同作用。盡管它們是血液中的一類細胞成分，但它們功能的??? |
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠L-型電壓依賴性鈣離子通道α1D亞基(CACNα1D)ELISA試劑盒 ，英文名： CACNα1D ELISA Kit
人FMS樣酪激酶3(Flt3)ELISA檢測試劑盒HumanFMS-liketyrosinekinase3,Flt3ELISAKit 96T/48T
大鼠骨形態(tài)形成蛋白拮抗蛋白免疫試劑盒 Rat Gremlin ELISA Kit
CLIAKitfor大鼠c-fosELISAKit大鼠c-fos規(guī)格：48T/96T
硫素(thionin)復(fù)染試劑盒50次
ELISAKitFcγGFc片段規(guī)格：48T/96T
小鼠血管生成素受體Tie2(ANG-R-Tie2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat pulmonary surfacta associated protein A (SP-A) ELISA Kit 大鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒
Humangalactose-6-sulphatesulphatase,Gal-6SELISAKit 人半乳糖6硫酸酯酶(Gal-6S)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
包蟲抗體IgG(間接法二步法)
油菜培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑
Mouseierferon-inducibleprotein16,IFI16/p16ELISAKit小鼠γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
牛骨髓單核細胞小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白6(IGFBP-6)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠巨噬細胞炎性蛋白1δ(MIP-1δ/CCL15)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子(PARC/CCL18)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠(LZM)ELISAKit ELISA. 96T/48T
操作方法：
組織塊直接培養(yǎng)法（原代細胞培養(yǎng)實驗）
材料與儀器
【動物】選擇大約一半足孕時間的胚胎，10－13天齡胚胎含有最大數(shù)量的未分化的間質(zhì)細胞，成纖維細胞可從這些細胞衍生獲得。每組小鼠胚胎1個【實驗材料】每組的超凈臺中有以下物品：1.50ml配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS)1瓶；100ml 0.25%瓶；PBS(-)1瓶2.100ml滅菌燒杯2個；3、50ml離心筒2個4、滅菌培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個5、1ml，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個6、細胞計數(shù)板1塊；7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把；8、酒精燈1臺；
步驟
1) 胚胎的分離。適用哺乳動物(倉鼠、小鼠和大鼠)2)將1－2個胚胎轉(zhuǎn)移至一個小的無菌培養(yǎng)皿中，用新的無菌剪刀小心地絞碎胚胎，用PBS漂洗。3)在無菌狀態(tài)下，將絞碎的胚胎轉(zhuǎn)移于一50ml的無菌離心筒中,加入40ml 0.25％的無菌,用攪拌棒輕輕攪動。4)在溫暖的環(huán)境中或置于37°C培養(yǎng)箱中輕輕搖動15分鐘。5)讓存留的組織塊在重力作用下慢慢沉降，將含有懸浮細胞的液體轉(zhuǎn)移至一無菌50ml的離心管中，該管內(nèi)按照每10ml上清加入l ml小牛血清的比例加入牛血清以滅活,。6)加人新鮮溶液(見前述步驟)于含有殘留未消化組織塊的原來的50ml離心筒中，重復(fù)步驟4和5。7)離心混合的細胞懸液，1200r/rain，5分鐘，棄上清。8)用新鮮的無菌PBS重懸沉淀的細胞，按步驟7再次離心。9)用PBS反復(fù)洗滌細胞直至上清清亮為止。
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