型 號
產(chǎn)品時間2024-12-07
所屬分類兔原代細胞
報價2600
原代細胞的分離培養(yǎng)：
原代培養(yǎng)即直接從有機體取下細胞、組織或器官，讓它們在體外維持與生長。原代培養(yǎng)的特點是細胞或組織剛離開機體，它們的生物性狀尚未發(fā)生很大的改變，在一定程度上可反映它們在體內(nèi)的狀態(tài)，表現(xiàn)出來源組織或細胞的特性， 因此用于藥物實驗，尤其是藥物對細胞活動、結(jié)構、代謝、有無毒性或殺傷作用等，是的工具。常用的原代培養(yǎng)法有組織塊培養(yǎng)法和消化培養(yǎng)法。
（一）組織塊培養(yǎng)法
許多實驗室喜歡用組織塊培養(yǎng)法進行原代培養(yǎng)，因為方法簡單，細胞也較容易生長。尤其是培養(yǎng)心肌，有時還可觀察到心肌組織塊搏動。細胞從組織塊邊緣向外長出并鋪滿培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶后， 即可進行傳代。
1. 設備材料
培養(yǎng)箱、冰箱、超凈工作臺／無菌間、無菌吸管、離心管、酒精燈、試管架、培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿、消化液、基礎培養(yǎng)液、胎牛血清、Hanks 溶液、雙抗試液、剪刀、攝子、小燒杯。
2. 操作步驟
（1） 在無菌條件下，取待培養(yǎng)的組織適量，置入小燒杯中， 以適量Hanks 溶液清洗2~3 次，去掉組織塊表面的血污。
（2）用眼科剪將組織塊反復剪成0.5~ 1mm3的小塊。
（3）再用Hanks 溶液反復漂洗， 直至液體不混濁為止。等組織塊下沉，將燒杯傾斜，用小吸管盡量吸除Hanks 溶液。
（4）用含20%滅活血清及雙抗溶液(200U/ml、200μg/ml）的培養(yǎng)液再清洗，用吸管吸干后加入5ml 含20％血清的培養(yǎng)液。
（5）用彎頭吸管吸取組織小塊，均勻地置于培養(yǎng)皿內(nèi)表面，吸去多余的培養(yǎng)液，各組織小塊之間相距0.5cm 為宜。蓋好培養(yǎng)皿蓋，做好標記， 置37°C 的CO2培養(yǎng)箱內(nèi)。
（6） 2~4h 后，于超凈工作臺中，緩緩地向培養(yǎng)皿中加入上述含20％血清及雙抗溶液( 100U/ml 及100μg/ml ）的培養(yǎng)液少量，以使組織塊浸沒在培養(yǎng)液中。
（7）輕輕地將培養(yǎng)皿及組織塊移至CO2 培養(yǎng)箱， 如無特殊情況，不必觀察。1~2 周后，可觀察到細胞從組織塊邊緣長出，形成生長暈。
（9） 一般說來，若培養(yǎng)液無明顯改變， 1 周換液1 次即可。待細胞長滿整個培養(yǎng)皿內(nèi)表面，即可進行傳代培養(yǎng)。
兔肺動脈內(nèi)皮細胞
細胞基本屬性：
產(chǎn)品名稱 | 兔肺動脈內(nèi)皮細胞 | 組織來源 | 肺動脈 |
種屬 | 兔 | 生長特性 | 貼壁生長 |
形態(tài)特征 | 內(nèi)皮細胞樣 | 英文名稱 | Pulmonary Artery Endothelial Cells |
貨號 | EY-XY3815 | 規(guī)格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 |
質(zhì)量檢測：血管假性血友病因子（vWF）免疫熒光染色為陽性，純度高于 90%，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等
產(chǎn)品規(guī)格：5x105cells/T25或1mL凍存管
培養(yǎng)基：兔肺動脈內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基
培養(yǎng)條件：氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃
換液頻率：每2-3天換液一次
消化液：0.25%
產(chǎn)品貨期現(xiàn)貨，1周左右
運輸方式T25培養(yǎng)瓶/ 順豐快遞（包郵）
供應限制僅限于科學研究，絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用
背景介紹：
肺動脈血管內(nèi)皮細胞是一種多功能細胞，尤其在肺的非呼吸功能方面更具特殊意義。當其受損，肺血管通透性升高導致肺水腫，在成年人呼吸窘迫綜合癥發(fā)生機制中具有重要意義。但是處于體內(nèi)多因素共同作用的復雜環(huán)境中，對肺血管內(nèi)皮細胞的功能和代謝以及病變發(fā)生機制很難作深入研究。原代肺動脈內(nèi)皮細胞的體外培養(yǎng)系統(tǒng)有助于在特定的體外條件下研究肺血管內(nèi)皮細胞的功能。 |
公司正在出售的產(chǎn)品：
鋅指蛋白777抗體
體液單胺氧化酶A型（MAO－A）活性化學發(fā)光法定量檢測試劑盒
（包括標記探針）
通用型HHV6（HUMAN HERPESVIRUS 6）病毒定性檢測試劑盒
石蠟切片組織TNF ALPHA蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒
非蛋白/游離巰基含量比色法定量檢測試劑盒
冰凍切片半-4（CASPASE-4）活性原位熒光染色檢測試劑盒
細胞MUSK激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）
酵母細胞周期S后期同步（SYNCHRONY）處理試劑盒
（TOLUIDINE BLUE）原位染色試劑盒
組織短鏈羥脂酰脫氫酶（HYDROXYACYL COA DEHYDROGENASE）活性比色法定量檢測試劑盒
細胞銅離子濃度熒光定量檢測試劑盒
細胞色素P450亞酶51（羊毛甾醇1，4α去甲基化酶）活性
細胞鈣鈉交換體（NCX）蛋白表達熒光定量檢測試劑盒
冰凍切片基質(zhì)金屬2（MMP2）原位明膠酶譜法（in situ zymography）熒光染色試劑盒
胚胎干細胞內(nèi)皮細胞（endothelial）定向分化試劑盒
載脂蛋白O抗體
鈣營養(yǎng)蛋白1/鈣結(jié)合蛋白8抗體
驅(qū)動蛋白家族成員15抗體
JAK和微管相互作用蛋白2/JAK和微管相互作用蛋白2抗體
細胞分裂周期相關蛋白JPO2抗體
X射線修復交叉互補蛋白3抗體
跨膜蛋白59樣蛋白抗體
兔肺動脈內(nèi)皮細胞APC標記人CD94單克隆抗體
操作方法：
組織塊直接培養(yǎng)法（原代細胞培養(yǎng)實驗）
材料與儀器
【動物】選擇大約一半足孕時間的胚胎，10－13天齡胚胎含有最大數(shù)量的未分化的間質(zhì)細胞，成纖維細胞可從這些細胞衍生獲得。每組小鼠胚胎1個【實驗材料】每組的超凈臺中有以下物品：1.50ml配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS)1瓶；100ml 0.25%瓶；PBS(-)1瓶2.100ml滅菌燒杯2個；3、50ml離心筒2個4、滅菌培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個5、1ml，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個6、細胞計數(shù)板1塊；7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把；8、酒精燈1臺；
步驟
1) 胚胎的分離。適用哺乳動物(倉鼠、小鼠和大鼠)2)將1－2個胚胎轉(zhuǎn)移至一個小的無菌培養(yǎng)皿中，用新的無菌剪刀小心地絞碎胚胎，用PBS漂洗。3)在無菌狀態(tài)下，將絞碎的胚胎轉(zhuǎn)移于一50ml的無菌離心筒中,加入40ml 0.25％的無菌,用攪拌棒輕輕攪動。4)在溫暖的環(huán)境中或置于37°C培養(yǎng)箱中輕輕搖動15分鐘。5)讓存留的組織塊在重力作用下慢慢沉降，將含有懸浮細胞的液體轉(zhuǎn)移至一無菌50ml的離心管中，該管內(nèi)按照每10ml上清加入l ml小牛血清的比例加入牛血清以滅活,。6)加人新鮮溶液(見前述步驟)于含有殘留未消化組織塊的原來的50ml離心筒中，重復步驟4和5。7)離心混合的細胞懸液，1200r/rain，5分鐘，棄上清。8)用新鮮的無菌PBS重懸沉淀的細胞，按步驟7再次離心。9)用PBS反復洗滌細胞直至上清清亮為止。
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