型 號
產品時間2024-12-06
所屬分類小鼠原代細胞
報價2600
產品名稱 | 小鼠支氣管平滑肌細胞 | 貨號 | EY-XY3611 |
英文名稱 | Bronchial Smooth Muscle Cells | 規(guī)格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 |
質量檢測：平滑肌肌動蛋白（α-SMA）免疫熒光染色為陽性，純度高于 90%，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等
產品規(guī)格：5x105cells/T25或1mL凍存管
培養(yǎng)基：小鼠支氣管平滑肌細胞培養(yǎng)基
培養(yǎng)條件：氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃
換液頻率：每2-3天換液一次
消化液：0.25%
產品貨期現(xiàn)貨，1周左右
運輸方式T25培養(yǎng)瓶/ 順豐快遞（包郵）
供應限制僅限于科學研究，絕不可作為動物或人類疾病的治療產品使用
小鼠支氣管平滑肌細胞采用-膠原酶聯(lián)合消化法結合差速貼壁法制備而來，小鼠支氣管平滑肌細胞分離自支氣管組織；支氣管（Bronchi），是指由支氣管分出的各級分枝，由支氣管分出的一級支氣管，即左、右主支氣管。左主支氣管與右主支氣管相比較，前者較細長，走向傾斜；后者較粗短，走向較前者略直，所以經支氣管墮入的異物多進入右主支氣管。支氣管和支氣管還有以區(qū)別就是，支氣管是以“C"型的支氣管軟骨為支架，而支氣管不是。支氣管平滑肌細胞主要功能：①支氣管平滑肌細胞能維持支氣管張力 |
收貨處理取出T25細胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2，飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)
傳代密度細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)
傳代代數(shù)可傳5代左右；3代以內狀態(tài)最佳
傳代比例傳代建議1：2傳代，1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿
傳代方法
1.吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次；
2.添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后，吸出多余消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化；
3.用吸管輕輕吹打混勻，按1:2比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；
4.待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后每2-3天換液一次新鮮的培養(yǎng)基。
1.準備：取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺面，紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2.布局：點燃酒精燈，安裝吸管帽。
3.處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2~3次，去除血污；如懷疑組織可能污染，可先置于含有青的混合液中30~60分鐘。
4.剪切：用眼科剪把組織切成2~3毫米大小的塊，以便于消化。加入比組織塊總量多30~50倍的液，然后一并倒入三角燒瓶中，結扎瓶口或塞以膠塞。
5.消化：或用恒溫水浴，或置于37℃溫箱消化均可，消化中每隔20分鐘應搖動一次，如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時間依組織塊的大小和組織的硬度而定。
6.分離：在消化過程中見消化液發(fā)混濁時，可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察，如組織已分散成細胞團或單個細胞，立即終止消化，隨即通過適宜不銹鋼篩，濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速（500~1000轉/分）離心消化液5分鐘，吸出上清，加入適量含有血清的培養(yǎng)液。
7.計數(shù)：用計數(shù)板計數(shù)，如細胞懸液細胞密度過大，再補加培養(yǎng)液調整后，分裝入培養(yǎng)瓶中。對大多數(shù)細胞來說，pH要求在7.2~7.4范圍，培養(yǎng)液呈微紅色，如顏色偏黃，說明液體變酸，可用NaHCO3調整。
8.培養(yǎng)：置于36.5℃溫箱培養(yǎng)，如用CO2溫箱培養(yǎng)，瓶蓋需擰松半圈。
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