傳代培養操作步驟：
一、貼壁培養
細胞傳代培養操作步驟如下：
（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細胞形態和生長密度，當細胞生長密度達到80%~90%時，即可進行傳代。
（2）吸掉或倒掉培養瓶內的培養液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。
（3）根據培養瓶大小向瓶內加入適量含EDTA的，一般應覆蓋整個培養瓶底。
（4）把培養瓶放入37℃ CO2培養箱進行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發現有70%~80%細胞收縮變圓、細胞間隙變大時，再輕輕拍打培養瓶使剩余細胞脫落，然后立即加入2倍量的培養液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。
（5）吸出所有細胞懸液至離心管內，1000rpm/min離心3~5min。
（6）棄上清，加入適量培養液重懸細胞，輕輕吹打混勻，使細胞均勻分散。
（7）用吸頭吸取適量細胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養瓶中，補足培養液，搖勻，放置于37℃ CO2培養箱中進行培養。
（8）根據細胞生長狀態確定換液或傳代時間，甚至進行細胞凍存。
HL-7702人肝細胞
細胞基本屬性：
產品名稱 | HL-7702人肝細胞 | 組織來源 | 肝 |
種屬 | 人 | 生長特性 | 貼壁生長 |
細胞代數 | 10代以內 | 細胞形態 | 上皮細胞樣 |
支原體檢測 | 無 | 凍存條件 | 無血清凍存液，液氮儲存 |
細胞詳細介紹：
細胞別稱 HL-7702; HL7702；人肝細胞 背景簡介 HL-7702細胞是人正常肝細胞；HL-7702細胞群體倍增時間約為20小時，細胞形態呈上皮樣細胞。在電子顯微鏡下，亦顯示上皮細胞所具有的橋粒和張力原纖維，HL-7702細胞增殖迅速，AFP與CK-19表達陰性，ALB表達在10μg/ml水平，部分細胞多次傳代后發生形態變異，ALB表達缺失。(STR檢測位點同HELA) 細胞規格 1x106cells/T25或1mL凍存管 培養基 80%RPMI-1640+20%FBS 培養條件 氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃ 凍存條件無血清凍存液，液氮儲 發貨方式復蘇發貨（免運輸費用）/ 凍存發貨（需加干冰運輸費用） 順豐快遞 供應限制僅限于科學研究，絕不可作為動物或人類疾病的治療產品使用 特別說明以下細胞培養凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產品說明書為主 |
二、懸浮細胞
傳代培養操作步驟如下：
一般實驗室中懸浮細胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養液中含有細胞碎片的情況下）。當在顯微鏡下觀察到懸浮細胞已經長滿至80%~90%（細胞懸液變黃）時，即可進行傳代。
（1）嚴格進行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應無菌，且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上，以免細胞發生污染。
（2）所用培養液必須適宜細胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細胞，對培養液的要求不一樣，必要時可用預實驗的方法選擇適當的培養液。
（3）胎牛血清對于維持細胞生存，促進細胞生長起著關鍵作用。可根據文獻或預實驗選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應保持用至實驗完成。
（4）消化細胞時應避免消化時間過短導致消化不收集到的細胞數量少，或消化時間過長導致細胞成團塊樣絮狀游離，這時的細胞已有損傷或死亡，影響細胞數量和實驗進度。
（5）細胞離心的時候應避免離心力過小收集的細胞數量不夠，或離心力過大對細胞產生損傷。離心后的細胞沉淀棄去上清后，應先彈散細胞沉淀，再加入培養液重懸，這樣比直接吹打對細胞損傷小，可以提高細胞活率。
（6）吹打細胞時應盡量避免細胞的產生，以免損傷細胞，影響細胞狀態（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內可以減少氣泡的產生）。
公司正在出售的產品：
CL-0448SW 1990(人胰腺癌細胞)5×106cells/瓶×2 兔p物質(SP)ELISA 試劑盒 Goat Anti-Guinea IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標記的羊抗豚鼠IgG 0.1ml
FREM2： 細胞外基質蛋白FREM2抗體 HK-2, 人腎皮質近曲小管上皮細胞 Human
NHEK.f single donor Pellet 正常人表皮角質細胞團塊(少年者) > 1 mio.cells 小鼠顆粒細胞MGC 兔p53(p53)ELISA 試劑盒 Goat Anti-Guinea IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標記的羊抗豚鼠IgG 0.1ml
FRG1： 面肩肱型肌營養不良癥相關蛋白FRG1抗體 豚鼠源細胞
M1(小鼠白血病細胞) 5×106cells/瓶×2 兔C反應蛋白(CRP)ELISA試劑盒 Goat Anti-Guinea IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的羊抗豚鼠IgG 0.1ml
QGY-7703(人肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2 7721(7721肝癌細胞) 大鼠脫氫酶(XDH)ELISA試劑盒 RANTES/CCL5(Human regulated on activation in normal T-cell expressed and secreted) 人正常T細胞表達和分泌因子 96T
Phospho-MARCKS (Ser162)： 0酸化蛋白激酶C底物Marcks抗體 人腎上腺皮質腺癌細胞;NCI-H295R
IL18BP Protein Human 重組人 IL18BPa 蛋白 (His & Fc 標簽) 大鼠脫氫酶(ALDH)ELISA試劑盒 P-Selectin(Human P-Selectin/CD62P/GMP140) 人P選擇素 96T
Met (c Met)： 肝細胞生長因子受體抗體 PGK1 Others Mouse 小鼠 PGK1 / PGKA 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠食管上皮細胞培養基 100mL 大鼠脫氫表雄酮酯(DHEA-S)ELISA試劑盒 Lep IgG ISA Kit 大鼠鉤端IgG 96T
HL-7702人肝細胞Integrin alpha L： 整合素αL抗體 人晶狀體上皮細胞HLEpiC
CXCL12 Protein Human 重組人 CXCL12 / SDF-1 蛋白 (isoform a) 人表皮生長因子受體2(Her2)ELISA 試劑盒 MAGE-1 黑色素瘤相關 0.5mg
Interferon alpha： 干擾素α抗體 CHN1 Others Human 人 CHN1 / Chimerin 1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
人結腸平滑肌細胞培養基 100mL 人表皮生長因子受體(EGFR)ELISA試劑盒 MAPKK1 (MAP kinase kinase 1) 原活化蛋白激酶激酶1抗原 0.5mg
Phospho-INPPL1(Ser576)： 0酸化肌醇聚0酸鹽0酸酶樣蛋白1抗體 長尾綠猴胚胎細胞;4179 病毒轉染小鼠細胞，PT-67細胞 SMMC-7721(肝癌細胞)
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