傳代培養操作步驟：
一、貼壁培養
細胞傳代培養操作步驟如下：
（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細胞形態和生長密度，當細胞生長密度達到80%~90%時，即可進行傳代。
（2）吸掉或倒掉培養瓶內的培養液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。
（3）根據培養瓶大小向瓶內加入適量含EDTA的，一般應覆蓋整個培養瓶底。
（4）把培養瓶放入37℃ CO2培養箱進行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發現有70%~80%細胞收縮變圓、細胞間隙變大時，再輕輕拍打培養瓶使剩余細胞脫落，然后立即加入2倍量的培養液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。
（5）吸出所有細胞懸液至離心管內，1000rpm/min離心3~5min。
（6）棄上清，加入適量培養液重懸細胞，輕輕吹打混勻，使細胞均勻分散。
（7）用吸頭吸取適量細胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養瓶中，補足培養液，搖勻，放置于37℃ CO2培養箱中進行培養。
（8）根據細胞生長狀態確定換液或傳代時間，甚至進行細胞凍存。
NCI-H3255人肺癌細胞
細胞基本屬性：
產品名稱 | NCI-H3255人肺癌細胞（STR鑒定正確） | 組織來源 | 肺 |
種屬 | 人 | 生長特性 | 貼壁生長 |
細胞代數 | 10代以內 | 細胞形態 | 上皮細胞樣 |
細胞規格 | 1x106cells/T25或1mL凍存管 | 凍存條件 | 無血清凍存液，液氮儲存 |
細胞詳細介紹：
細胞別稱 H3255；NCI-H3255；人肺癌細胞 支原體檢測 無 培養基 90%RPMI-1640+10% FBS 培養條件 氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃ 凍存條件無血清凍存液，液氮儲 發貨方式復蘇發貨（免運輸費用）/ 凍存發貨（需加干冰運輸費用） 順豐快遞 供應限制僅限于科學研究，絕不可作為動物或人類疾病的治療產品使用 特別說明以下細胞培養凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產品說明書為主 |
二、懸浮細胞
傳代培養操作步驟如下：
一般實驗室中懸浮細胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養液中含有細胞碎片的情況下）。當在顯微鏡下觀察到懸浮細胞已經長滿至80%~90%（細胞懸液變黃）時，即可進行傳代。
（1）嚴格進行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應無菌，且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上，以免細胞發生污染。
（2）所用培養液必須適宜細胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細胞，對培養液的要求不一樣，必要時可用預實驗的方法選擇適當的培養液。
（3）胎牛血清對于維持細胞生存，促進細胞生長起著關鍵作用?？筛鶕墨I或預實驗選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應保持用至實驗完成。
（4）消化細胞時應避免消化時間過短導致消化不收集到的細胞數量少，或消化時間過長導致細胞成團塊樣絮狀游離，這時的細胞已有損傷或死亡，影響細胞數量和實驗進度。
（5）細胞離心的時候應避免離心力過小收集的細胞數量不夠，或離心力過大對細胞產生損傷。離心后的細胞沉淀棄去上清后，應先彈散細胞沉淀，再加入培養液重懸，這樣比直接吹打對細胞損傷小，可以提高細胞活率。
（6）吹打細胞時應盡量避免細胞的產生，以免損傷細胞，影響細胞狀態（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內可以減少氣泡的產生）。
公司正在出售的產品：
HPlEpC-c 人類胎盤細胞上皮細胞 500,000cells 食管平滑肌細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) 豚鼠腸脂肪酸結合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒 Rabbit Anti-dog IgG/PE PE標記的兔抗狗IgG 0.1ml
FKBP135： FKBP135蛋白抗體 CM-H128人角膜上皮細胞培養基100mL
V79(倉鼠肺細胞) 5×106cells/瓶×2 豚鼠腸脂肪酸結合蛋白(iFABP)ELISA 試劑盒 IgG/Bio 標記的驢抗兔IgG 0.1ml
FKBP25： 肽基脯酸異構酶酶FKBP25抗體 20. 細胞系統
人導管癌細胞;ZR-75-30 豚鼠補體因子B(CFB)ELISA試劑盒 Goat Anti-rabbit IgG/Bio 標記的羊抗兔IgG 0.1ml
NCI-H1703(人肺鱗癌細胞) 5×106cells/瓶×2 PA317(成纖維細胞) 大鼠血管內皮生長因子121(VEGF121)ELISA試劑盒 ADM (Rabbit soluble endothelial protein C receptor) 兔子腎上腺髓質素 96T
MSH6： 錯配修復蛋白6抗體 牛胚氣管細胞;EB (NBL-4)
IFNL3 Protein Human 重組人 IFNL3 / IL28B / Ierleukin-28B 蛋白 (His 標簽) 大鼠血管緊張素轉化酶2(ACE2)ELISA試劑盒 D-LDH 大鼠D-乳酸脫氫酶 96T
Mammaglobin B： 珠蛋白2抗體 LRRN3 Others Human 人 LRRN3 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠腦成纖維細胞培養基 100mL 大鼠血管緊張素轉化酶(ACE)ELISA試劑盒 VEGFR-2/sFLK-1(Human soluble vascular endothelial growth factor receptor-2) 人可溶性血管內皮生長因子受體2 96T
NCI-H3255人肺癌細胞D407細胞，人視網膜色素上皮細胞 出芽短梗霉 人急性T淋巴細胞性白血病細胞;I 2.1(CRL-2572) 人(T)ELISA 試劑盒 DAD1 (dopamine D1 receptor) 多巴胺受體-D1抗原 1mg
Hephaestin： 亞鐵氧化酶抗體 COCH Others Human 人 COCH / Cochlin 人細胞裂解液 (陽性對照)
水牛皮膚成纖維樣細胞;WB-S1 人高香草酸(HVA) ELISA 試劑盒 DRD3 receptor(dopamine D3 receptor) 多巴胺受體-D3抗原 0.5mg
HERC1： 鳥苷酸釋放因子p532蛋白抗體 人膀胱上皮永生化細胞;SV-HUC-1
NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Sain L](小鼠成纖維 5×106cells/瓶×2 小鼠 AMICA1 / JAML 人細胞裂解液 (陽性對照) 人高鐵血紅蛋白(MHB)ELISA 試劑盒 DRD4 receptor peptide 多巴胺受體-D4抗原 0.5mg
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