脫水和透明
所謂脫水就是利用脫水劑將組織內(nèi)的水分置換出來(lái)，以利于有機(jī)溶劑的滲入，這一過程稱為脫水。脫水是否*，直接關(guān)系到組織是否能充分透明，而脫水過度（原因是組織在純酒精內(nèi)時(shí)間過久，發(fā)生組織質(zhì)地發(fā)生變化）容易造成組織發(fā)脆。造成組織發(fā)脆的原因還有加溫（溫度超過35℃）、脫水劑內(nèi)加有丙酮、浸蠟用的石蠟中二甲苯過多等等。ELISA試劑盒
一般我們總認(rèn)為組織發(fā)脆跟高濃度酒精有關(guān)，而忽視了與低濃度的酒精關(guān)系，其實(shí)低濃度的酒精具有強(qiáng)大的穿透力，比純酒精更容易滲透到組織塊內(nèi)部使之脫水，組織如果在低濃度酒精里充分脫水，在高濃度酒精里只需脫去從低濃度到高濃度之間的水份，因此，僅需短時(shí)間就可完成，如果這時(shí)不縮短純酒精的時(shí)間，便會(huì)引起組織發(fā)脆；如果脫水時(shí)加溫，使用丙酮，還可引起組織收縮，并影響免疫組織化學(xué)的標(biāo)記。
為了使石蠟浸入到組織塊內(nèi)，必須經(jīng)過一種既能與脫水劑混合，又能與石蠟相溶的媒介物質(zhì)，這個(gè)過程稱透明。目前的透明劑是二甲苯。很多人認(rèn)為二甲苯極容易使組織發(fā)脆，這個(gè)觀點(diǎn)很片面，在常溫下，如果不是時(shí)間過長(zhǎng)（超過２4小時(shí)以上）二甲苯并不會(huì)引起組織過份發(fā)脆，相反會(huì)使某些組織結(jié)構(gòu)比較質(zhì)韌的組織：比如子宮肌瘤等相當(dāng)好切），但是當(dāng)二甲苯溫度超過35℃以后，極易引起組織發(fā)脆。所以本人認(rèn)為，大小標(biāo)本分開脫水，一般情況下，大標(biāo)本脫水時(shí)間（室溫18℃）以80％酒精2小時(shí)、95％酒精（2道）各1個(gè)半小時(shí)至2小時(shí)、純酒精（3道）各1個(gè)半小時(shí)至2小時(shí)，二甲苯（2道）各30-60分鐘為宜；小標(biāo)本脫水時(shí)間應(yīng)相應(yīng)縮短。ELISA試劑盒
脫水時(shí)間長(zhǎng)短，與室溫高低有密切的相關(guān)。我們?cè)趯?shí)踐中發(fā)現(xiàn)，室溫在12～15℃時(shí)，可作為一個(gè)臨界溫度范圍。當(dāng)室溫高于此溫度范圍時(shí)，組織容易脫水，可適當(dāng)縮短脫水時(shí)間；而室溫低于該溫度范圍時(shí)，應(yīng)適當(dāng)延長(zhǎng)脫水時(shí)間（如能保證在一個(gè)恒定的溫度下）。更換試劑，應(yīng)以量為基礎(chǔ)，定量更換，不能等到切片不好時(shí)再去更換。否則，至少會(huì)有2～3批組織切片不好。根據(jù)我科經(jīng)驗(yàn)，如試劑用量為500ml，每500個(gè)蠟塊更換一次為宜。ELISA試劑盒
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